干细胞体外诱导精子（用干细胞制造可育精子）

精子干细胞体外培养有望治疗男性不育。本发明利用免疫磁珠激活细胞分选术获得纯度99%的精原干细胞，并通过Matrigel构建三维系统，增加诱导分化的关键因素，体外诱导精原干细胞，获得具有受精能力的精子细胞。

1、在这项研究中，研究人员利用终端修饰胆固醇的DNA，将DNA单链锚定在细胞膜上。DNA作为纳米材料，具有合成方便、序列设计方便等优点；通过碱基配对，两个互补的DNA单链可以形成具有特定识别功能的分子列表。当小鼠乳腺干细胞从体内分离纯化时，用DNA链将其与特定的巢细胞按1比例精确绑定，形成细胞对。

2、结果表明，当机械力调节和旁分泌Wnt信号调节同时存在时，干细胞的扩增效率可提高近4倍。

体外干细胞诱导精子

1、Ribooldi等检测到非梗阻性无精子症患者睾丸细胞中CD49F-阳性细胞和睾丸支持细胞共培养5天后的单倍体细胞。CD49F不是人类精原干细胞的特殊表面标记，人类支持细胞也表达了CD49F。此外，它还存在以下缺点：由于CD49F不是人类精原干细胞的特定表面标记，起始细胞纯度不够；只检测精子，诱导效率不明确；没有功能检测，无法确定诱导精子细胞是否具有功能。

2、将睾丸组织放入DMEM/F12中，切成小块，用DMEM/F12清洗，去除残留血细胞；技术实现要素：

3、将步骤1)所得睾丸组织切成半液态，加入DMEM/F将睾丸组织转移到容器中；

4、在睾丸组织中加入酶消化液Ⅰ，在水浴摇床上孵化；

5、镜检，确保所有组织块消化成单个生精管，将含有生精管的消化液转移到另一个新的离心管中，加入新鲜的DMEM/F12和10�S终止消化；

体外干细胞诱导精子

1、李郑、黄一然(上海交通大学医学院仁济医院泌尿外科、上海男科研究所精子发育与遗传学实验室、上海人类精子库、上海2万1；上海交通大学BioX中心评估了IPS体外向生精细胞自发分化的潜力。方法：经类胚体(EB)身体诱导iPS向生精细胞分化，实时定量PCR和PCR检测生精细胞相关基因的表达。

2、Msy

3、Scpl基因减数分裂期、随着诱导时间的延长，Scp3和单倍体基因底座敲击3首先表达增加，然后表达下降。结论：iPS在EB自发分化过程中表达精细胞不同时期的相关基因，表达雄性配子单倍体基因，具有向雄性配子分化的潜力。诱导多能干细胞；类胚体；生精细胞；基因表达中图分类号：R2文献标志码：A文章编号：10093591（2011）O1-0008-／nv／troLIPeng，HUHong．1iang，ZHANGLing．1ing，DINGHui，ZHANGWei，TIANRuhui，LIUPing，SHIZhan．ping，GUOXi．。

4、Chi一眦；Shanghai

5、China、Objective：(iPS)